神经氨酸酶与病毒感染息息相关,其在人体内具有抗原性,通过催化唾液酸水解,协助成熟流感病毒脱离宿主细胞感染新的细胞,抑制神经氨酸酶是目前治疗流感的主要手段之一。在主流抗流感药物奥司他韦、扎米那韦逐步暴露病毒耐药性与毒副作用的情况下,寻找筛选新型的、低毒副作用的替代药物显得迫在眉睫。荆芥是中药中经典的抗流感药物,有良好的抗病毒活性,并具有低毒副作用的优点,由此,以神经氨酸酶为特定靶点,筛选荆芥中潜在抑制该酶活性的活性成分,开展其物质基础研究。Biacore T200分子互作分析系统作为主要研究手段,为该研究提供助力。
该研究对此提供了一项可行的研究策略:通过亲和超滤技术对中药提取物与神经氨酸酶的共孵育结合成分进行过滤筛选,液质联用技术对亲和性成分进行鉴定,鉴定出的成分通过实时动态的Biacore分子互作分析测定,能够客观表征出小分子与神经氨酸酶之间的亲和及动力学特征,并获取反应结合能力的客观亲和力数据。最后进行体外生物学活性检测验证并发现荆芥中具有神经氨酸酶抑制剂活性的小分子,为荆芥的进一步开发研究提供了参考。该策略尤其适用于中药提取物等复杂体系,可高效、便捷、准确的获得基于特定靶点的活性小分子化合物。
Fig.基于SPR测定单体与神经氨酸酶的结合活性(KD值为亲和力)
Identification of chemical compounds ofSchizonepeta tenuifoliaBriq. and screening of neuraminidase inhibitors based on AUF-MS and SPR technology,Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis,2023
【原文链接】
https://doi.org/10.1016/j.jpba.2023.115787
Biacore分子互作分析系统简介
BiacoreT200分子互作分析系统是基于表面等离子共振(surface Plasmon resonance, SPR)开发的新型生物分析传感技术,具有实时、无标记、高灵敏度等检测优势,。该系统可实时跟踪在传感芯片表面发生的分子结合情况,并获取与相互作用相关的一系列特征并进行高质量综合鉴定,包括分子间结合活性、亲和力、动力学、热力学参数等。主要用于检测核酸与蛋白相互作用、蛋白-蛋白相互作用、蛋白与小分子结合、垂钓实验以及复杂样品中待测蛋白质浓度的测定等。目前,以Biacore为代表的SPR技术已被收录于中、美、日三国药典,是分子互作研究领域的“金标准”。
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